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ELISA 试剂盒 17 个操作技巧你了解几个吗?

点击次数:243 发布时间:2018/9/5 15:37:40
      对于做 elisa 实验的老师们来说,elisa 做的成功与否?存在很多小技巧,这些小技巧看起来微不足道,但是实际上却在实验中起到了至关重要的作用,掌握这些小技巧,可以让你在 elisa 实验的时候更加熟练,大大增加 elisa 实验成功的几率。

ELISA 试剂盒 17 个相关操作技巧如下:


  1. 切记在加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。


  2. 合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。


  3. 在吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。


  4. 务必做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。


  5. 样品稀释液应用加液器加注,并经常校对其准确性。


  6. 为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。


  7. 未使用完的酶标板或者试剂,请于 2-8℃ 保存。辣根过氧化物酶标记抗人 IgG 工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人 IgG 工作液。


  8. ELISA试剂盒实验中,加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。


  9. 剩余样品及废弃物应经 121℃ 高压蒸汽灭菌 30 分钟,或用 5.0g/L 次氯酸钠等消毒剂处理 30 分钟后废弃。


  10. 人 ELISA 试剂盒洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。


  11. 每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是*后加底物溶液及 2N H2SO4。测量时先用此孔调 OD 值至零。


  12. 手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置 15~30s,不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。


  13. 对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。


  14. 没有去离子水或双蒸水时,可以使用娃哈哈纯净水配制溶液,切勿使用自来水。


  15. 在使用微量加样器时,吸取不同瓶子中液体后要更换枪头,即使吸取标准品溶液。


  16. 吸取液体时速度不易太快,以免产生气泡,人 ELISA 试剂盒吸取的量不够准确。


  17. 吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸,减少误差。

原创作者:上海远慕生物科技有限公司

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