企业档案
- 会员类型：免费会员
- 工商认证： 【已认证】
- 最后认证时间：
- 法人：
- 注册号：
- 企业类型：代理商
- 注册资金：人民币50万
联系我们
联系人：王宇豪
热门标签
技术文章
远慕生物:抗体的生产制备进程剖析抗体特异性差
点击次数：366 发布时间：2019/8/16 10:49:21
抗体是生物学科研工作中有力的东西，没有。这些“制导武器”，会在研究中自动寻觅并结合研究者感兴趣的目标，并可经过各种示踪技能将目标展现出来。正是因为抗体的专一特性，研究者或许会依赖于示踪试验所显示的成果对所研靶标给出定性或定量的判断。也正因此，毫无疑问的，专一性或特异性是抗体zui受科研工作者重视的特性。那么，抗体特异性首要由什么决定？为什么常听到多抗特异性不如单抗的说法？在试验中，是该挑选单抗仍是多抗？
下面咱们将就抗体的生产制备进程剖析抗体特异性差异的原因。
咱们不“生产”抗体，咱们只是大自然的“挑选”工抗体的制备，无论是单抗仍是多抗，其前期的动物免疫进程是完全相同的，差异仅仅在挑选。或者说，单抗是在多抗制备的基础上，进一步挑选并安稳表达特异单克隆细胞株的成果。当抗原免疫动物后，在淋巴结和脾等淋巴器官内经过一系列抗原处理和递呈，促进B淋巴浆母细胞（Plasmablasts, PBs）分解老练，在转录水平成为排泄特异抗体的B淋巴浆细胞（Plasma cells, PCs），很多不同的浆细胞会排泄不同的针对抗原的抗体。由此，可以说每一个B浆细胞都成为一株单克隆抗体的候选者。
传统的单克隆抗体制备便是经过将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞系交融，挑选可以排泄特异抗体并安稳传代的交融细胞株而实现的。而多克隆抗体（多抗）的制备便是从血清中分离纯化一切的未经挑选的单克隆抗体。从以上进程可以看出，无论是单抗仍是多抗制备办法，其针对靶点（抗原）的特异性抗体的发作首要源于被免疫动物本身的浆细胞分解老练，抗体生产者（人）其实并没有做什么。
不同在于，多克隆抗体犹如许多单克隆抗体的调集，它们有的特异性高，有的特异性低，总体特异性符合正态分布曲线的方式（如Fig1），而其特异性的总体表现也应处于统计学正态曲线中位线（MID）的水平。而单抗制备后续的挑选进程，可去除大部分的非特异抗体，保存几株特异性较好的单克隆抗体。
然而，单抗制备进程中的细胞交融是一个随机发作的进程，动物脾脏内的各种细胞如内皮、平滑肌、巨噬、NK、T、还有红细胞、血小板等都或许与骨髓瘤细胞系发作交融。尽管B细胞是脾脏内首要的淋巴细胞，但可以排泄特异性抗体的老练浆细胞占脾细胞的比例很低，加之促细胞交融试剂如PEG等的细胞毒性，使得终成功交融形成安稳表达特异性抗体的杂交瘤细胞系的功率极低，大约为10-6。因此，在单抗制备进程中，大部分排泄特异性抗体的B细胞或许都被丢失了。终获得的单克隆抗体其亲和力和特异性或许都不是本次免疫中zui好的。
原创作者：上海远慕生物科技有限公司
