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OX-B,猪食欲素/阿立新BELISA试剂盒
点击次数：66发布时间：2015/7/2 14:21:23
更新日期：2015/7/2 14:21:23
所 在 地：美洲
产品型号：
品牌名称：R&D
相关标签：OX-B 猪食欲素/阿立新BELISA试剂盒说明书
优质供应
详细内容
保存条件：2-8℃低温保存
保质期：6个月，所有试剂盒均提供*新批次。
试剂盒成分：酶标板，试剂，标准品等。
二、间接法是检测抗体*常用的方法，其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体，故称为间接法。操作步骤如下：
(1)将特异性抗原与固相载体连接，形成固相抗原：洗涤除去未结合的抗原及杂质。
(2)加稀释的受检血清：其中的特异抗体与抗原结合，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后，固相载体上只留下特异性抗体。其他免疫球蛋白及血清中的杂质由于不能与固相抗原结合，在洗涤过程中被洗去。
(3)加酶标抗抗体：与固相复合物中的抗体结合，从而使该抗体问接地标记上酶。洗涤后，固相载体上的酶量就代表特异性抗体的量。例如欲测人对某种疾病的抗体，可用酶标羊抗人IgG抗体。
(4)加底物显色：颜色深度代表标本中受检抗体的量。
本法只要更换不同的固相抗原，可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。
三、标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
3．组织处理：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
四、判定猪食欲素/阿立新BELISA试剂盒结果计算
对于新入行不久，对ELISA的结果分析这块不太熟悉。客户的实验是通过人源的蛋白作为抗原，兔源多克隆抗体作为一抗（我们就是为了通过做ELISA来检测其效价），然后通过辣根过氧化物作为二抗及显色组分。实验做完了，但不知道怎么分析结果，例如标准曲线怎么做之类的。另外，还想问一下，有没有实用的软件可用来分析。对于客户的问题回答：
间接ELISA要是试剂盒，会有标准品的，把标准品按一定浓度梯度稀释一块儿做（一般有三个重复），*后酶标仪或分光光度计比色，用软件（oringe）绘制标准曲线，的出公式，按公式将样品带入公式，
用于ELISA结果计算*方便的是logit曲线。曲线的横坐标用标样各浓度（ng/ml 或其他单位）的自然对数表示，纵坐标用各浓度显色值的logit值表示。Logit值的计算方法如下：
B/B0 B
Logit（B/B0）=ln———— =ln————
1-B/B0 B0-B
其中B0是0ng/ml孔的显色值，B是其它浓度的显色值。
五、猪食欲素/阿立新BELISA试剂盒所需要样本处理及要求:
1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右 (2000-3000转/分)去除颗粒。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清 。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
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