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公司动态

标题山羊ELISA试剂盒操作规范-齐一生物

发布时间:2016/9/29  来源: 齐一生物科技(上海)有限公司   阅读次数:161        

本文由专注于提供生物科技服务的ELISA试剂盒厂商齐一生物发布
羊ELISA试剂盒操作步骤

1、标准品的稀释:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为9mmol/L6 mmol/L3 mmol/L1.5mmol/L, 0.75 mmol/L)。

2、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3、温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4、配液:将3048T20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水3048T20倍)倍稀释后备用。

5、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6、加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7、温育:操作同3

8、洗涤:操作同5

9、显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟

10、终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

羊ELISA试剂盒洗板方法

手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。

自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

山羊ELISA试剂盒注意事项:

试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

底物请避光保存。

严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

本试剂不同批号组分不得混用。

如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

山羊ELISA试剂盒计算:

以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,    

在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD      

值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释      

倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标      

准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值      

代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释      

倍数,即为样品的实际浓度。  

山羊检测试剂盒检测范围、 OD值:

具体请咨询在线客服,或者来电索要详细说明书!

 

齐一生物科技(上海)有限公司主要经营进口原装Elisa试剂盒,自产品牌QIYBO试剂盒,种类齐全,价格实惠,凡购买我公司产品的新老客户,即可享免费代测实验服务,可检测人源,小鼠,大鼠,猪,狗,猴,兔,羊,鸡,牛,鸭子,鱼,植物,昆虫等各种种属样本。全程提供技术支持。如需其他Elisa试剂盒说明书及报价,可来电咨询我公司

 

咨询电话:400-9910-197  021-60348467/60348496 

 

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