您的位置:首页 > 公司动态 >上海远慕生物科技有限公司 >证实CRISPR–Cas13可靶向哺乳动物细胞中的RNA
发布时间:2018/11/22 来源: 上海远慕生物科技有限公司 阅读次数:418
早在2016年,科学家们就发现了结合和切割单链RNA而不是DNA的CRISPR蛋白。如今,在一项新的研究中,来自美国麻省理工学院(MIT)的研究人员对这种被称作CRISPR-Cas13a的系统进行调整,使之在哺乳动物细胞中发挥作用。相关研究结果于2017年10月4日在线发表在Nature期刊上,论文标题为“RNA targeting with CRISPR–Cas13”。
在美国罗彻斯特大学开展RNA靶向CRISPR系统研究的Mitchell O’Connell(未参与这项研究)注意到,“在CRISPR之前,RNAi(RNA干扰)是调节基因表达的理想方法。但是Cas13a的重大益处之一是它似乎具有更强的特异性,而且这种系统对哺乳动物细胞而言并不是内源性的,因此你不太可能扰乱细胞中天然的转录后网络。相反,RNAi利用内源性机制开展基因敲降(gene knockdown,即抑制基因表达)。”
在这项新的研究中,来自MIT的张峰(Feng Zhang,音译)教授和他的同事们证实切割RNA的Cas13a酶(之前称作C2c2)能够特异性地降低哺乳动物细胞中的内源性RNA和报告RNA水平。 这些研究人员已从多种细菌物种中寻找一种能够切割大肠杆菌报告基因的Cas13a酶。张峰教授和他的同事们着重关注来自细菌Leptotrichia wadei的Cas13a酶,这是因为经证实它zui为高效地切割它的RNA靶标。
他们随后构造出一种双质粒RNA靶向CRISPR系统,该系统在不同的质粒上表达向导RNA(gRNA)和Cas13a基因,其中Cas13a基因含有一种经过改造的核定位序列(nuclear localization sequence)。在人细胞系中,这种CRISPR-Cas13a构造物高效地切割报告质粒(reporter plasmid)中转录的RNA和三种内源性基因转录的RNA。
这种RNA靶向系统能够类似地抑制体外培养的源自水稻(Oryza sativa)的原生质体(移除细胞壁的细胞)中的内源性基因。
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