请登录 免费注册

热搜:通用机械五金工具仪器仪表安防监控

频道
通用机械 电子元器件 行业设备 五金工具 电工电气 仪器仪表 安防监控 专用汽车 照明灯具 化工原料 涂料 塑胶 建筑原料 皮革 冶金
本周下载排行
人酪氨酸酶(TYR)活性elisa检测方法说明

您的位置:首页 > 技术文献 > 人酪氨酸酶(TYR)活性elisa检测方法说明

资料简介

                         酪氨酸TYR)活性试剂盒(ELISA

 

使用说: SU-B12124

 

l  血清体样 TYR活性

l  6个月

 

l  2-8

 

 

 

 

实验原理

试剂盒采用双抗体步夹心法酶联疫吸附试ELISA往预被人酪氨酸TYR) 抗体的包被微孔依次加入HRP记的检测抗过温育并彻底洗用 底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。 颜色的深浅和样品人酪氨酸TYR呈正相用酶标仪450nm 波长下测定吸光OD

,计算样品浓度。

 

 

 

样本处理及要求

1.    :全血本请于室温2小时或4夜后于1000g20分钟,取上清即可测, 或将标本放-20-80℃保,但应避免复冻融。

2.    :可EDTA或肝素为抗凝剂,标采集302 - 8°C 1000g20分钟, 或将标本放-20-80℃保,但应避免复冻融。

3.    细胞培养物上清或其它生物标1000g20分钟取上检测或将标本放-20℃ 或-80℃保存,但应避免复冻融。 注:标本溶血会影最后检测结果因此溶血标不宜进行此


需要而未提供的试剂和器材

 

1.    酶标仪(450nm

2.    高精度加样器及枪0.5-10uL2-20uL20-200uL200-1000uL

3.    37℃恒温箱

4. 蒸馏水或去离子水

 

 

试剂盒组成

 

名称

96 孔配置

48 孔配置

备注

微孔酶标板

8 ×12

8 ×6

标准品

0.3mL*6

0.3mL*6

样本稀释液

6mL

3mL

检测抗-HRP

10mL

5mL

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

按说明书进行稀释

底物 A

6mL

3mL

底物 B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

封板膜

2

2

说明书

1

1

自封袋

1

1

1.    标准品度依次为160804020105 U/mL

2. 经过大量正常标本检验,本的正常度值均在剂盒提供的检测范围内,实过程中 直接取50μL样本上样可。当有部分本值超过最大准品浓度时可用样本稀释液将标本 进行适当稀释后再行实验。

 

注意事项

1.    严格按照规的时间和度进行育以保证确结果所有试剂必须在使用达到室 温 20-25℃。使用后立即冷藏保试剂。

2.    洗板不正确以导致不确的结。在加入物前确尽量吸干内液体。温过程中 不要让微孔干燥掉。

3.    消除板底残留的液和手指印,否影响 OD 值。

4.    底物显色液应呈无或很浅的颜色已经变蓝的物液不能使

5.    避免试剂和标本的叉污染以免造错误结果。

6.    在储存和温育时避强光直接照射。

7.    平衡至室温后再打密封袋以防水凝聚在冷板上。

8.    任何反应试不能接触白溶剂漂白溶剂散发的烈气体。何漂白成分会破坏 试剂盒中反应试剂生物活性。


9.    不能使用过期产品。

10. 果可能播疾,所有样品应管理,按规定的序处样品检测装

 

 

试剂准备

试剂盒从冷藏环境取出应在室温衡后方可使

 

20×洗涤缓冲液的稀释蒸馏水120稀释,120×洗涤缓冲液19份蒸馏水。

 

 

 

操作步骤

1.    从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用密封放回 4℃。

2.    设置标准品孔和本孔,标准品各加不同浓的标准品 50μL

3.    样本孔中加入待样本 50μL;空白孔加。

4.    除空白孔外标准品和样孔中每加入辣过氧化HRP)标记的检

100μL,用封板膜住反应孔37水浴锅或恒箱温育 60min

5.    弃去液体,吸纸上拍干每孔加满洗350μL,静置 1min,甩去洗涤,吸水纸 上拍干,如此重复洗板 5 次(也可洗板机洗板

6.    每孔加入底物 AB 50μL37℃避光孵育 15min

7.    每孔加入终止液 50μL15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。

 

 

 

实验结果计算

以所测标准品OD为横坐标标准的浓值为纵在坐标或用相关软件绘

制标准曲线,并得直线回归方将样品OD代入方程,计出样的浓度。

 

 

试剂盒性能

 

1.   检测范围:5 U/mL 160 U/mL

2.   灵敏度:最低检测度小于 1.0 U/mL

3.   特异性:不与其它性结构类物交叉反应。

4.   重复性:板内、板变异系数均小于 15%

相关产品:人酪氨酸酶(TYR)活性  

版权声明

凡本网注明"来源:易推广"的所有作品,版权均属于易推广,未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用。已获本网授权的作品,应在授权范围内

使用,并注明"来源:易推广"。违者本网将追究相关法律责任。

本信息由注册会员:劲马免疫学第三方检测中心发布并且负责版权等法律责任。

最新产品 - 今日最热门报道-分类浏览 - 每日产品
  • 易推广客服微信