“上海劲马”文献：MK － 801 对脑缺血大鼠神经功能缺损及脑 NGF 表达的影响
陈宏坤1，2 ，杨春壮3 ，徐 望4 ，王佩文4 ，张 晓4 ，王明月4 ，张立娜4
( 1. 佳木斯大学，黑龙江 佳木斯 154007; 2. 牡丹江第二人民医院脑科医院; 3. 牡丹江医学院解剖教研室; 4. 牡丹江医学院
2011 级临床系本科生，黑龙江  牡丹江 157000)

摘要: 目的 观察 MK － 801 对脑缺血大鼠神经功能缺损及脑神经生长因子( NGF) 表达的影响，探讨 MK － 801 治疗脑缺血的机制。方法 采用线栓法制做脑缺血大鼠模型，将大鼠分为三组: 假手术组、模型组和药物组，每组各 24 只。药物组腹腔注射 MK － 801( 0. 6mg / kg / d) ，其余注射同容积生理盐水。于注射后 3 天、7 天、14 天每组各取 8 只进行神经功能缺损评分及处死取脑，应用酶联免疫吸附试验( ELISA 法) 测定 NGF 含量。结果 神经功能缺损评分在第 3 天模型组和药物组没有显著差异，第 7 天、第 14 天药物组较模型组有显著差异( P ＜ 0. 01) ; NGF 表达在第 3 天模型组和药物组没有显著差异，但与假手术组有显著差异( P ＜ 0. 001 或 P ＜ 0. 05) ，第 7 天、第 14 天药物组较模型组有显著差异( P ＜ 0. 001 或 P ＜ 0. 05) 。结论MK － 801 通过提高脑内 NGF 的表达，改善运动功能状况可能是其治疗缺血性脑血管疾病的机制之一。
关键词: MK － 801 脑缺血 神经功能缺损 NGF
中图分类号: Ｒ338     文献标识码: A 文章编号: 1001 － 7550( 2015) 02 － 0034 － 03
脑血管疾病是目前公认的仅次于恶性肿瘤和心血管疾病严重危害人类健康和生命的三大疾病之一，其中缺血性脑血管病( Ischemic cerebral vascular
disease，ICVD)  约占全部脑血管病的 80%  。ICVD具有高发病率、高死亡率、高致残率、高复发率的特点，因而是基础和临床医学科学研究的重点、热点和难点。脑缺血的损伤包括多种病理过程，而兴奋性毒性是其主要机制之一。地卓西平马来酸盐( MK －801) 是离子型谷氨酸受体拮抗剂。本研究采用线栓法建立大脑中动脉闭塞( MCAO) 动物模型，观察不同时间点脑缺血大鼠神经功能缺失症状以及神经生长因子( nerve  growth  factor，NGF)  表达的动态变化，探讨 MK － 801 对局灶性脑缺血损伤神经保护的可能作用机制。
1 材料和方法
1. 1  仪器和试剂  Multiskan MK3 酶标仪( Thermo 热电上海仪器有限公司)   ，大鼠神经生长因子( NGF) 酶联免疫试剂盒( 上海劲马生物科技有限公司) 。

1. 2  动物分组  健康成年 Wistar 大鼠 72 只，体重( 250 ± 50) g［由黑龙江中医药大学实验动物中心提供，实验动物合格证号: SCXK( 黑) 2008004 ］，其中48 只制备脑缺血模型，之后再随机分为 2 组，模型组 24 只，药物组 24 只; 另外 24 只作为假手术组。

1. 3   模型制备   20% 乌拉坦( 1. 5g / kg) 行腹腔注射麻醉大鼠。颈正中消毒切开，在左侧颈前肌旁分离颈总动脉( CCA) 、颈外动脉 ( ECA) 和颈内动脉( ICA) 。先结扎 CCA，并在其远端和动脉分叉间挂线备用，再用动脉夹暂时夹闭左 ECA 和 ICA，在结扎处和备用挂线之间的 CCA 剪口，将线栓顺行插入并扎紧备用线，松开动脉夹继续下线，适当调整进线角度，直至尼龙线插入深度为距动脉分叉约 18 ±0.5mm 处。术毕撒消炎粉，缝合创口。手术后符合以下 4 项体征即模型成功: ( 1) 动物苏醒后表现为提尾时右侧前肢内收屈曲; ( 2 ) 左侧 Hornor 氏征; ( 3) 爬行时向右划圈; ( 4) 站立时右侧倾倒。

1.4 给药方法 各组于术后开始用药，药物组腹腔注射 MK － 801( 0. 6mg / kg / d) ，其余各组同时以等容量生理盐水注射。

1. 5 神经功能缺损评分 参照 Zea － longa［1］评定神经系统缺损程度的 5 级 4 分法标准: 0 分: 无神经功能损伤症状，活动正常。1 分: 轻微局灶性神经功能缺损，悬尾试验不能完全伸展对侧前爪。2 分: 中度局灶性神经功能缺损，向瘫痪侧旋转征象。3 分: 重度局灶性神经功能缺损，向病灶对侧倾倒。4 分: 不能自发行走，意识水平下降。

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