使用目的:
本试剂盒用于测定昆虫血清、血浆、组织及相关液体样本中活性氧(ROS)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中昆虫活性氧(ROS)水平。用纯化的昆虫活性氧(ROS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入活性氧(ROS),再与 HRP 标记的活性氧(ROS)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的活性氧(ROS)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中昆虫活性氧(ROS)浓度。
昆虫活性氧(ROS)酶联免疫分析试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品(80IU/ml) 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂 A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
6 显色剂 B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。昆虫活性氧(ROS)酶联免疫分析试剂盒操作步骤
3. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
40 IU/ml 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液
20 IU/ml 4 号标准品 150μl 的 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
10 IU/ml 3 号标准品 150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
5IU/ml 2 号标准品 150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
2.5 IU/ml 1 号标准品 150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液