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劲马文献:DAB 显色试剂盒在文献中的应用

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所属分类：应用方法
文件大小：776 KB
文件类型：pdf
上传时间：2020/4/24
上传者：上海劲马实验设备有限公司
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资料简介

丙泊酚长期镇静对大鼠认知功能及海马 RAGE 表达的影响
王君艳董涛白栓成

【摘要】目的本研究拟观察丙泊酚长期镇静对大鼠认知功能及海马高级糖基化终末产物受体（RAGE）蛋白表达的影响及认知功能改变与海马 RAGE 蛋白表达有无关系，为临床提供依据。方法（1）选取成年雄性 Wistar 大鼠 12 只，随机分为对照组、丙泊酚组。（2）丙泊酚组每天连续输注 8 h，连续给药 5 d，对照组给予生理盐水。应用 Morris 水迷宫对两组大鼠开始连续 5 d 的行为学观察，记录逃逸潜伏期和空间探索时间。（3）大鼠末次水迷宫测试 1 h 后，取大鼠海马，分别用 ELISA 法和免疫组织化学法测定 RAGE 蛋白的表达。结果（1）定位航行试验：①与对照组比较，丙泊酚组在第 1～4 天逃逸潜伏期延长（P<0.05）；②对照组 4 个时点的两两比较显示：与第 1 天比较第 2、4 天逃逸潜伏期缩短（P<0.05）。丙泊酚组在 4 个时点的两两比较显示：与第 1 天比较第 4 天逃逸潜伏期缩短（P<0.05）。（2）空间探索试验：与对照组比较，丙泊酚组空间探索时间缩短，穿越平台次数减少（P<0.05）。（3）海马 RAGE 表达：ELISA 法测定 RAGE蛋白结果，与对照组比较，丙泊酚组海马 RAGE 蛋白表达上调（P<0.05）；（4）免疫组化法测定 RAGE 蛋白结果：与对照组比较，异丙酚组海马 CA1 区 RAGE 免疫组化染色阳性细胞数增加。结论丙泊酚长期镇静可损害成年大鼠的空间学习记忆能力，导致成年大鼠认知功能降低，可能与其上调海马 RAGE 表达有关。

【关键词】二异丙酚；催眠药和镇静药；认知障碍；糖基化终产物，高级丙泊酚作为重症患者临床上应用最为广泛的镇静药物之一，可能影响患者认知功能。其临床特点是起效迅速，无明显蓄积，苏醒快而完全。Pain 等[1]发现给大鼠腹腔注射低于镇静剂量的丙泊酚，结果发现大鼠的记忆能力仍受到损伤。因此本研究拟通过观察丙泊酚不同给药时间对成年大鼠行为学及脑内高级糖基化终末产物受体（RAGE）表达影响，对镇静药引起认知功能损害机制进行初步探讨。

材料与方法
一、实验材料
1. 药物与试剂：丙泊酚注射液（江苏恩华药业），兔抗大鼠 RAGE Elisa 试剂盒、大鼠 RAGE IHC 试剂盒（美国 Santa Cruz 公司），DAB 显色试剂盒（上海劲马生物科技有限公司）。

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