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恒远文献:IL-37,TNF-a大鼠酶联免疫试剂盒在文献中的应用

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资料简介

白 细 胞介素-37及相关因子在急性肺损伤大鼠模型中的作用及意义
孙云晖 ,王一新 ,马雪梅 ,杨晓东 ,鲍文华
佳木斯大学附属第一医院呼吸内科(黑龙江 佳木斯 154003)

【 摘要 】 目 的 研 究在急性 肺损 伤大 鼠肺组织 中 白 细胞介素 -3 7 ( i n ter l eu kin 3 7 ,I L - 3 7 ) 及 相关 因 子的 表达水平 , 阐 述 I L -3 7 在急性肺损伤 中 的 作用 及意义, 并进一步探究急性肺损伤 发病机 制 方 法 将 45 只 清洁级 Wi st a r大 鼠按 随 机数字表法分 为健 康对 照组 、 博来霉素组 、 地塞 米松 治疗 组 , 每组大 鼠 1 5 只 , 博来霉素组 及地塞米松治疗组 大 鼠气管 内 给予 博来霉 素 4 m g/ kg 制 作急性肺损伤模型 , 健康 对照组给 予相 同 体积生 理盐水 作为 对照, 地塞米 松治疗组大 鼠于急 性肺损伤造模基础 卜 第 2 d 每 日 腹 腔 注射地塞米松 3 m g/ kg. 健康对照组、 博 来霉素组 大 鼠 腹腔注 射生 理盐 水作为 对照 。 各 组大 鼠分别于造模后 7 、 1 4 、 28 d 处 死 , H E 染 色评价 肺组织病理形 态学变化 , 分 别测 定 肺组织匀 架 中 I L -3 7 、 血清肿瘤 坏死因 子-n ( t u mo r n ec ro s i s fa ct o r n , TN F -n ) 含 M , RT -P CR 法 检测 肺组织I L - 1 8 m RN A 表达 量 . 结 果 病理形态 学检查提示 : 健康 对照 组大 鼠在各 时间 点 肺组织结 构 完整 , 无炎性及 纤维化改变 ; 博来 霉素组 、 地 塞米松治疗组大 鼠肺组织 由 早 期急性肺泡炎 性 改变 发展 为 晚 期纤维 化性改 变 , 地塞 米 松治疗 组 急 性炎 症 及肺 纤维 化性改 变 在 同 时 间 点较博 来霉 素 组 减轻 。 博来 霉素 组 、 地 塞 米 松 治 疗组 的 I L-37 和TNF-a 含 量及 I L -1 8 m RN A 表 达于第 7 d 升高 至 最高点, 后逐 渐降 低 , 至第 2 8 d 均高于健康 对照 组 ,差 异有统计学意 义 ( i> 均< 〇. 〇 5 ) 结论 I L -3 7 在大 鼠急性肺损伤发病过程 中起 重要作用 ,该 作用 可 能与 调控 I L-1 8 、 TN F-n 转导有关 。
【 关键词 】 急性肺损伤 ; 白 细胞介素 -37 ; 白 细胞介 素 -1 8 ; 肿 瘤坏死 因 子 -a急性肺损伤 ( ac ut e l un ginj ury , AL I ) 是指 由 严重感染 、 损伤 、 休克等 多种 因 素所导致的进行性加重 以 低 氧血症 为 特征 的 急性 呼吸 功能不 全或 呼吸衰竭m。 其 发病 机 制 尚 未 完全 阐 明 , 现有 的 研究结果认 为 过度 失 调 的 炎 症反 应是 导致 ALI 发生 、发 展 的 最 为 重 要 的 因 素 之 一m。 白 细 胞 介 素( i nte rl e ukin ,IL )-3 7 是 I L -1 家族细胞 因 子, 目 前认为 I L-3 7 可通过负 反 馈调节 机制 调节先天 性及固 有免疫应答 , 通过抑 制促 炎细胞 因 子 、 趋化 因 子等 的产 生 和 对 基 因 转 录 调 节 , 从 而抑 制 过度 炎 症 反应[ 3 1。 已 有研究 表明 I L-3 7 可通过调控 I L-1 8 、 肿瘤坏死因 子-a ( tumor ne cr osi s fact or a , TNF -a) 在类风湿关节炎、 溃疡性结肠炎等 炎症及免疫性疾病中 起重要作用, 但在 ALI 中 鲜 有研究 。 本实验观察 AL I大 鼠肺组织 中 I L- 3 7 水平、 I L -1 8 mRNA 表达 以 及血清 TNF -a 含量 , 旨在 阐 明 I L- 3 7 及 相关 因子 在 AL I发病机制 中 的作用 及意义 。
1 材料与方 法
1 . 1 材料
注射用 盐酸 博来 霉素 ( 海正 辉瑞制 药有 限 公司 ) , 苏木精-伊红 ( he matoxyl i n-e o si n ,H E ) 染色试剂 ( 湖 北锦源 医疗科技有 限公 司 ) ;Ni kon e c l i ps e5 0 i 显 微镜 ( 北 京 中 仪光科科技 发 展 有 限 公 司 提供 ) ;IL -3 7 、 TNF -a 大 鼠酶联 免疫吸附试剂盒 ( 上海恒 远生 物科技有 限公 司 ) , RNA 提取试剂盒 (北京艾德莱生物科技有 限公司 ) ,cDNA 反转录试剂 盒及 P CR 试剂盒 ( 大连宝生物工程有限公司 ) 。


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