ELISA试剂盒办法活络,特异性强不需要特别设备,所以被广泛应用于各种抗原和抗体测定。
但ELISA测定中影响要素较多,而且其操作中有一定的技术请求,在临床检验中除正常反响外,有时常可见到一些过错成果(即假阳性或假阴性)如标本的影响为我们解读ELISA检测的影响要素。
在冰箱中保留过久的标本,在间接法ELISA测定中会致使本底过深、形成假阳性;为战胜上述搅扰,测定的血清标本宜为新鲜收集;如不能当即测定,5d内测定的血清标本可存放于4℃,1周后测定的血清标本应低温冻存;冻存后融解的标本,蛋白质部分浓缩,分布不均,应充沛混合后再测定,但混匀时应轻柔,不行激烈振动。
ELISA试剂盒标本受细菌污染。
因菌体中也许富含内源性辣根过氧化物酶,因而,被细菌污染的标本同溶血标本相同,亦可发生非特异性显色而搅扰测定成果。
标本的影响
溶血标本及混有红细胞的血清采用ELISA法检测易发生假阳性。
标本保留不妥。
也许是溶血血清中富含过氧化酶物质(红细胞或血红蛋白中的亚铁血红素),在洗刷过程中通常难以完全洗脱,它可使H2O2释放出原生态氧,然后催化底物四甲基联苯胺生成可溶性的有色物质,即显蓝色,发生假阳性。
ELISA试剂盒严峻溶血标本禁用。