内毒素指示剂使用说明书
【用途】
烘箱验证用内毒素指示剂（Endotoxin Challenge Vial, ECV）应用于验证干热除热原系统的效果。
本品为致热原，严禁以任何途径进入机体。
【试剂】
每安瓿烘箱验证用内毒素指示剂含≥1250EU内毒素。
ECV 效价系参照中国生物制品检定所的细菌内毒素国家标准品和相应批号的鲎试剂标定，
标示于安瓿。请注意选用与其相匹配的鲎试剂批号。
【内毒素指示剂效价验证】
1.任取1-2支未烤过的ECVs, 用1.0ml 细菌内毒素检查用水溶解， 在旋涡混合器上剧烈振摇15
分钟。
2.然后稀释所得溶液P/2λ、P/λ、2P/λ和4P/λ倍, 按中国药典附录细菌内毒素检查法凝胶半定量
试验的方法确定其效价。其中，P为ECV标示值, λ为鲎试剂标示灵敏度, 每步稀释均应在旋
涡混合器上剧烈振摇2分钟。
例如：选用鲎试剂（λ=0.125EU/ml）来验证内毒素指示剂（P=1250EU/支）的活性单位。
内毒素指示剂的稀释倍数为P/2λ = 5000、P/λ = 10,000、2P/λ = 20,000和4P/λ = 40,000倍。
3.如果用定量法鲎试剂则稀释步骤1所得溶液P/λ倍, 确定ECV的效价。
内毒素指示剂使用说明书 【实验步骤】
1.试验在最大装载条件下进行，在烘箱的各冷点位置分别放置1-2支ECVs，运行实际的干热除
热原程序。
2.将上述烘烤过的ECVs用1.0 ml细菌内毒素检查用水溶解， 在旋涡混合器上剧烈振摇15分钟。
3.将该溶液稀释n倍, n = P/（Rs·λ），
P为ECV标示值, Rs为评价标准规定的内毒素效价下降倍数, λ为鲎试剂标示灵敏度。
若P = 1250EU/支, Rs = 10000, λ=0.125EU/ml,
则 n = 1250/（10000 × 0.125） = 1, 即不用稀释。
若P = 1250EU/支, Rs = 1000, λ=0.125EU/ml,
则 n = 1250/（1000 × 0.125） = 10, 即稀释10倍。
4.若用凝胶半定量试验的方法确定其效价, 则需将溶液分别稀释P/（Rs·2λ），P/（Rs·λ）, 2P/（Rs·λ）,
和4P/（Rs·λ）倍。
5.用灵敏度为λ的凝胶鲎试剂（或用定量法鲎试剂）来确定步骤3或4溶液的内毒素浓度，计算
出烘烤过的ECV的效价。
内毒素指示剂使用说明书 【效价下降倍数的计算】
效价下降倍数R = 未烘烤ECV的效价平均值 / 烘烤过ECV的效价平均值。
若R大于1000 （或10000, 依评价标准而定）, 干热除热原效果符合标准, 反之, 不符合。
【注意事项】本品为致热原，仅供体外使用，严禁以任何途径进入机体。
