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类胡萝卜素(carotenoid)含量试剂盒说明书
分光光度法 50 管/48 样注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
类胡萝卜素是一种脂溶性且具有营养特性的化合物,给植物和动物提供天然色素,是重要的抗氧化剂,并有能力转换为必需维生素。类胡萝卜素可预防细胞,组织和基因损毁,增强身体免疫系统,抵御感染,减少癌症风险,保护心脏。
类胡萝卜素(carotenoid)含量试剂盒测定原理
样品通过混合有机溶剂萃取,类胡萝卜素与非类胡萝卜素成分分离,在 448nm 处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、烘箱,100 目筛、三角瓶或烧杯、漏斗,纱布、玻璃试管、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿。
试剂组成和配制
试剂一:液体 200mL×10 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 100mL×10 瓶。4℃保存。
提取液:临用前可按照试剂一(V):试剂二(V)= 2:1 混匀,封口膜封紧,防止挥发,配置好的提取液 4℃保存。
样本处理
组织样品:60℃烘干粉碎,过 100 目筛,称约 0.01g,加 2mL 提取液,37℃振荡提取 60min。
测定操作表
| 空白管 | 测定管 |
|
|
|
样本(μL) |
| 1000 |
提取液(μL) | 1000 |
|
于 1mL 玻璃比色皿,迅速测定 448nm 处吸光值 A,分别记为 A 空白管和 A 测定管, △A=A 测定管-A 空白管
类胡萝卜素(carotenoid)含量试剂盒注意:空白管只需测定一次。计算公式
1、标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0521x +0.0082;x 为标准品浓度(μg/mL),y 为吸光值。
2、类胡萝卜素含量(μg/g)= (△A-0.0082)÷0.0521×V 样总÷W = 38.4×△A÷W
V 样总:提取液总体积,2mL; W:样本质量,g
注意事项
1. 提取液易挥发,有毒性,操作时做好防护措施。
2. 测定必须能迅速,防止挥发造成误差。
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