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标题细胞因子ELISA试剂盒操作中须注意的细节

   

提供者:恒远免疫学第三方检测中心    发布时间:2019/1/18   阅读次数:198次 >>进入该公司展台
    ELISA试剂盒的操作中的每个细节对于试验的成功与否都有着直接的联系。下面,我们来看看细胞因子ELISA试剂盒操作中须注意的细节:
1、常采用的温度有43、37°c、室温、或者4°c等。37°czui常用,4°c效果zui好,但孵育时间有异;
2、要注意内源如风湿因子,补体,高浓度非特异性免疫球蛋白,异嗜性抗体及某些自身抗体等;外源如标本溶血,细菌污染,储存时间过长及凝固等因素影响。
3、在使用ELISA试剂盒时应注意:2-8℃保存(特殊情况除外)、同一品种不同批号试剂不能混用、不同品种试剂盒显色剂不能混用。
4、试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15~30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
5、浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
6、所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
7、不同批次组分之间试剂不得混用。
8、如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
9、各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内,如标本数量多,建议使用排枪加样。
10、应该注意试剂4°c冷藏时水化层形成,蛋白分子分布异常;
11、标本由于冷藏时Ig G聚合成多聚体,Fib非特异性吸附,反复冻融机械切力致使蛋白分子受损;
12、加样时不准,枪头吸样时插入样本液面下2mm为宜;
13、请每次测定的同时做标准曲线,zui好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数。
14、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
15、底物请避光保存。
16、严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
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