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标题怎么知道您的细胞正遭受支原体摧残呢

   

提供者:上海远慕生物科技有限公司    发布时间:2019/8/22   阅读次数:402次 >>进入该公司展台

培养细胞时,
发现细胞增殖变慢、
形态渐渐改变,
是血清或培养基的问题吗?
很有可能是你的细胞污染了~~~~~

 

支原体污染
细胞污染可分为细菌、霉菌、酵母菌、支原体污染,其中支原体污染发生的概率>50%。支原体(Mycoplasma) 是最小的原核生物,约0.1-0.3μm,可穿透0.22-0.45 μm 过滤膜 (BI血清经过3次0.1μm滤膜并且检测支原体)。
支原体污染棘手的原因之一是没有如其他污染源“立即可辨”的现象,支原体污染侵袭细胞但是并不一定致死。如果您的细胞出现如下状态:增殖变慢、形态变差、培养液变黄但是没有浑浊,说明您的细胞可能正遭受支原体的摧残!!


受支原体污染的293T              正常无污染的293T

 
支原体检测
怎么知道您的细胞正遭受支原体摧残呢,常见的检测方法几种:

1.分离培养法
将可疑样本接种到支原体培养基中,观察菌落生成。缺点:培养时间长,须3~5周才能判断。

2.DNA荧光染色法
利用荧光染剂 (Bisbenzimide, Hoechst 33258) 检测支原体污染,但若有些细胞易有荧光背景,可能会干扰结果判读。

3.PCR法
利用特异性引物,经PCR反应检测支原体DNA,灵敏且快速。
BI EZ-PCR支原体检测试剂盒:采用PCR法,简化了细胞培养中支原体污染的检测过程,可检测出细胞培养实验中常见的支原体污染。

试剂盒中包含独特的反应混合液,以及PCR中需要的所有试剂。使用者只需备有样品,最后产物跑完胶后,如有一个270bp的片段,则代表有支原体污染,整个检测过程耗时约4小时。

关键词:支原体检测  支原体污染    

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